ناقشت كلية الصيدلة رسالة الماجستير الموسومة ” التحقيق الكيميائي النباتي وتقييم التأثير السمي لنبات متسلق الشاي الأزرق (الفصيلة البقولية) المستزرع في العراق”، للطالبة ضحى نبهان صالح ومشرفها الأستاذ المساعد الدكتور أمجد حسيب خميس في فرع العقاقير والنباتات الطبية.
هدفت الدراسة إلى التحري عن المواد الكيميائية النباتية لنبات متسلق الشاي الأزرق المستزرع في العراق وتقييم التأثير السُمّي الخلوي لمستخلص الميثانول على خلايا الورم الأرومي الدبقي مقارنةً بالخلايا الليفية البشرية الطبيعية، وذلك لعدم توفر دراسات سابقة تتناول هذا النوع المستزرع محليا في العراق.
تضمنت الدراسة إزالة الدهون من النبات عن طريق النقع باستخدام الهكسان. بعد ذلك أُجري استخلاص للمادة النباتية باستخدام جهاز السوكسليت باستخدام ٨٥٪ من الميثانول المائي، تم تجزئة المستخلص باستخدام مجموعة من المذيبات ذات القطبية المختلفة (البتروليوم إيثر، الكلوروفورم، وإيثيل أسيتات).تم تحديد مختلف المكونات الفعالة في هذه الاجزاء عن طريق الاختبارات الكيميائية، وكروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة، والكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء، وتم استخدام كروماتوغرافيا الغاز- قياس الطيف الكتلي لتحليل جزء الهكسان. تم عزل أربع مركبات نقية باستخدام الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء التحضيرية (Preparative HPLC)، في حين جرى عزل مركب جديد باستخدام كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة التحضيرية (Preparative TLC) وجهاز الكروماتوغرافيا السائلة السريعة (Combi Flash). تمت دراسة هذه المركبات المعزولة بشكل أكثر تفصيلًا باستخدام عدة تقنيات تحليلية، تضمنت كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة، وتحليل الإرتفاع بواسطة الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء، إضافة إلى التحليل الطيفي بالأشعة تحت الحمراء (IR)، وقياس الطيف الكتلي للكروماتوغرافيا السائلة (LC–MS)، وكذلك تحليل الرنين المغناطيسي النووي للبروتون (^1H-NMR). تم تقييم النشاط السُمّي الخلوي للمستخلص الخام باستخدام اختبار ملون لتحديد نمو الخلايا على خلايا الورم الأرومي الدبقي والخلايا الليفية البشرية الطبيعية عولجت الخلايا بتراكيز من المستخلص بلغت ١٠٠٠، ٥٠٠، ٢٥٠، ١٢٥، ٦٢٫٥، و٣١٫٧٥ ميكروغرام/مل لمدة ٧٢ ساعة، ثم جرى تقييم حيوية الخلايا لاحقًا.
أظهرت النتائج وجود المركبات التالية (ستغمستيرول، حمض الأورسولي ، اللوبِيول، حمض بارا-كوماريك، حمض الكافئيك، حمض الفيروليك، حمض الغاليك، حمض الكلوروجينيك، الكاتيشين، الأبيجينين، الثيوفيلين، السكوبارون، سبعة-ألفا فواكانجين هيدروكسي إندوليني). تم عزل مركبات حمض الأورسوليك، اللوبِيول، حمض بارا-كوماريك، الثيوفيلين باستخدام عدة تحليلات متتابعة بالكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء، في حين تم فصل كومارين غير معروف بواسطة كروماتوغرافيا التحضيرية على الطبقة الرقيقة، وعُزل مركب غير معروف آخر من نوع القلويدات الإندولية باستخدام الكروماتوغرافيا السائلة السريعة (Combi Flash). أظهر المستخلص الميثانولي الخام تأثيرًا سُمّيًا خلويًا معتمدًا على التركيز تجاه خلايا الورم الأرومي الدبقي، حيث بلغت قيمة التركيز المثبط النصفي نحو ٦٢١٫٨ ميكروغرام/مل. في المقابل، حافظت الخلايا الليفية البشرية الطبيعية على حيوية تفوق ٨٠٪ عند جميع التراكيز المختبرة، دون تسجيل سُمّية خلوية ملحوظة عند التراكيز الأقل من ٥٠٠ ميكروغرام/مل.
أوصت الدراسة إلى أن نبات متسلق الشاي الأزرق المزروع في العراق يُعدّ مصدرًا طبيعيًا غنيًا بالمركبات الكيميائية النباتية، مما يشير إلى امتلاكه إمكانات واعدة للتطبيق في مجالات علم الأدوية والبحوث الصيدلانية.
